Research Article

调节鱼蛋白质丝氨酸和苏氨酸磷酸酶-2A子成员的Striatin基因编码A的分子克隆和发于表达模式

卷 16, 期 10, 2016

页: [923 - 932] 页: 10

弟呕挨: 10.2174/1566524017666170109130230

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摘要

目的:蛋白磷酸酶-2A(PP-2A)是真核生物中最重要的丝氨酸/苏氨酸磷酸酶之一。PP-2A的全酶由三个亚基组成:支架A亚基、催化C亚基、调节B亚基。虽然A和C亚基都由两种不同的基因编码,B亚基存在与26甚至更多的同工型,由至少15个不同的基因编码。过去的研究已经表明除了调节特异性PP-2A活性之外,各种B亚基可以具有其他功能。为了探索PP-2A的调节亚基在脊椎动物发育中的可能作用,我们克隆了编码金鱼角质素的基因,其是用PP-2A的B家族调节亚基的成员,并且确定他们的组织特异性和时间表达模式。 方法:以RT-PCR为基础的RACE进行cDNA克隆,使用RT-PCR分析金鱼角质形成细胞的mRNA表达水平。使用Western印迹分析测定来自金鱼的角蛋白表达水平。用U扫描软件进行mRNA和蛋白质表达水平的半定量。 结果:我们的研究揭示了条纹的全长cDNA由2965bp编码769个氨基酸的推导蛋白质,其与来自其他物种的同源蛋白具有非常高水平的氨基酸序列同一性。角蛋白mRNA在肾中高度表达,在脑、鳍、肌肉、肝、卵巢和鳃中较少程度,在睾丸和心脏中最低。在上述9种组织中检测到相似模式的蛋白质表达。在金鱼的发育过程中,条纹mRNA在2-细胞,多细胞和blastula阶段维持相对高的水平。然后,它基本上在原肠阶段下降并且在接下来的8个不同阶段中在该水平附近波动。在蛋白质水平,纹状体从2细胞到胃腔阶段保持较高水平,然后在神经和眼囊泡阶段减少,并逐渐增加到在眼睛色素沉着阶段达到峰值,然后在接下来的几个发展阶段略有减少。 结论:我们的研究结果表明,条纹可能在调控金鱼发展和成人组织体内平衡发挥重要作用。虽然前一功能可能通过PP-2A功能发生或可能不发生,但后一功能似乎通过PP-2A活动发生。

关键词: PP2A,调节B子成员,Striatin基因,动态平衡


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