Research Article

ROCK抑制剂Y-27632通过改变细胞生物力学性质促进人视网膜色素上皮细胞存活

卷 17, 期 9, 2017

页: [637 - 646] 页: 10

弟呕挨: 10.2174/1566524018666180316150936

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摘要

目的:视网膜色素上皮细胞(RPE)功能障碍或死亡是各类视网膜退行性疾病的常见病因。最近的报道表明ROCK途径抑制剂以细胞类型依赖性方式调节细胞增殖或凋亡。在这里,我们的目标是在体外研究ROCK抑制剂Y-27632对人视网膜色素上皮细胞(RPE)的作用。 方法:分别采用CCK-8和流式细胞术分析细胞增殖和凋亡。通过免疫荧光和免疫印迹检测细胞增殖标志物。使用扫描电子显微镜评估细胞形态。使用原子力显微镜(AFM)评估活细胞的形态和生物力学特性。另外,通过western印迹和免疫荧光检测细胞骨架和上皮 - 间质转化(EMT)标记。 结果:30μMY-27632显着促进细胞增殖并降低细胞凋亡。与对照组相比,用30μMY-27632处理的人视网膜色素上皮细胞系ARPE-19细胞显示出显着降低的细胞膜粗糙度(Ra:41.04±1.63nm对24.41±0.75nm,P <0.01; Rq:51.56±2.03nm与30.81±0.95nm比较,P <0.01),弹性模量增加(16.66±0.83KPa比32.55±1.48KPa,P <0.01)。另外,Y-27632抑制ROCK活性导致细胞伸长和细胞骨架微丝和微管的重组。 结论:综合起来,我们的数据表明Y-27632可以改变生物力学特性并重组细胞骨架以促进RPE细胞存活。这些结果是Y-27632在未来视网膜退行性疾病中应用的重要一步。

关键词: 视网膜色素上皮细胞,ROCK抑制剂,Y-27632,增殖,细胞骨架,机械性能。

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