密封蛋白-5的超表达与密封蛋白-1和-2的交互作用和视网膜细胞的屏障功能方面的作用

作者: R. Tian, Y. Luo, Q. Liu, M. Cai, J. Li, W. Sun, J. Wang, C. He, Y. Liu and X. Liu

卷 14, 期 9, 2014

页: [1226 - 1237] 页: 12

弟呕挨: 10.2174/1566524014666141015160355

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摘要

密封蛋白-5,一种显性紧密连接(TJs)蛋白,在维持血脑屏障功能和视网膜屏障中发挥重要作用。本研究旨在调查初期培养的人类视网膜色素上皮细胞(HRPECs)和人类视网膜内皮细胞(HRECs)中密封蛋白-5 超表达在与密封蛋白-1和-2的交互作用和屏障功能中的作用。慢病毒被用来调节视网膜细胞中密封蛋白-5的超表达。在转染组中检测到密封蛋白-5显著增加的mRNA和蛋白水平。 转染细胞在转染孔膜中生长三周后,一个稳定的单层细胞屏障模型在体外被建立。密封蛋白表达分析表明密封蛋白-5的超表达显著增加了密封蛋白-1的表达,而在mRNA和蛋白水平上均减低了密封蛋白-2的表达。Co-IP实验和屏障功能测试表明密封蛋白-5超表达促进其与密封蛋白-1和密封蛋白-2 的相互作用,并且加强视网膜细胞的屏障功能。有趣的是,密封蛋白-5的外源性表达诱发了视网膜细胞中密封蛋白-5和密封蛋白-1 或-2之间的一种新型相互作用类型,这没有内生性密封蛋白-5表达。另外,密封蛋白-5 超表达降低细胞迁移和体外导管形成的出芽能力。本研究表明密封蛋白-5 在视网膜屏障形成中起积极调节作用。密封蛋白的组成部分和它们之间的相互作用可被调节,这种动态属性对于TJs的功能很重要,从视网膜屏障的完整性到交联信号机制。

关键词: 屏障功能,密封蛋白-5,密封蛋白-1,密封蛋白-2,相互作用,紧密连接。


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