摘要
背景:我们以前的研究表明,果蝇中的Pygo(Pygopus)在成年心脏功能中起着至关重要的作用,而这在哺乳动物中可能是保守的。然而,其在人脐带间充质干细胞(hUC-MSC)分化为心肌细胞中的作用仍然未知。 目的:探讨pygo2在hUC-MSCs向心肌细胞分化中的作用。 方法:将第三代hUC-MSC分为两组:感染GV492-pygo2病毒的p +组和感染GV492病毒的p-组。感染和孵育3或21天后,进行定量实时PCR(qRT-PCR)以检测多能性标志物,包括OCT-4和SOX2。在感染后第7、14和21天分别通过免疫荧光检测Nkx2.5,Gata-4和cTnT。在转染病毒后一,二和三天,通过qRT-PCR分析了心脏相关基因的表达,包括Nkx2.5,Gata-4,TNNT2,MEF2c,ISL-1,FOXH1,KDR,αMHC和α-肌动蛋白。 3周。 结果:孵育三天后,与对照组相比,p +组hUC-MSC中多能干细胞标志物OCT-4和SOX2的表达没有明显变化(OCT-4:1.03±0.096 VS 1,P> 0.05,SOX2:1.071±0.189 VS 1,P> 0.05);但是,在21天后,观察到显着下降(OCT-4:0.164±0.098 VS 1,P <0.01,SOX2:0.209±0.109 VS 1,P <0.001)。温育7天后,中胚层专门化标志物,如Nkx2.5,Gata-4,MEF2c和KDR的表达增加。孵育后第14天,p +组的心脏基因(例如Nkx2.5,Gata-4,TNNT2,MEF2c,ISL-1,FOXH1,KDR,αMHC和α-肌动蛋白)的表达相对于p −组(P,0.05)。综上所述,这些发现表明pygo2的过表达导致更多的hUCMSC逐渐分化成心肌样细胞。 结论:我们是第一个表明pygo2的过表达显着增强心脏基因(包括Nkx2.5和Gata-4)的表达,并促进hUC-MSC分化为心肌样细胞的方法。
关键词: 人脐带间充质干细胞,pygo2,过表达,分化,心肌细胞,Nkx2.5,SOX2。
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